कोभिड-१९ को निदानका लागि प्रयोगशाला परीक्षणहरू हाल अभ्यासमा रहेका विज्ञहरूको अन्तर्राष्ट्रिय निकायहरूको सल्लाह अनुसार समीक्षा र मूल्याङ्कन गरिन्छ।
COVID-19 रोगचीनको वुहानबाट सुरु भएको यो संक्रमणले हालसम्म २०८ भन्दा बढी देशलाई प्रभावित पारेको छ । सारा विश्वको वैज्ञानिक समुदाय विगत केही महिनाहरूमा विकास गर्न महत्त्वपूर्ण चुनौतीको सामना गरिरहेको छ डायग्नोस्टिक परीक्षणहरू लागि Covid-19 महामारीको प्रभावकारी व्यवस्थापन र नियन्त्रण गर्न बिरामी र शंकास्पद व्यक्तिहरूको स्क्रीनिंग गर्न रोग पत्ता लगाउने।
हामीले COVID-19 पत्ता लगाउनका लागि प्रयोग गरिएका वर्तमान विधिहरू र अभ्यासहरूको मूल्याङ्कन गर्नु अघि, सर्वप्रथम COVID-19 के कारणले हुन्छ र यो रोगका बिरामीहरूको जाँच गर्न कसरी निदानात्मक परीक्षणहरू विकास गर्छ भनेर बुझौं। COVID-19 रोग सकारात्मक रूपमा फसेको आरएनएको कारणले हुन्छ भाइरस जुन जुनोटिक हो, जसको मतलब तिनीहरूले जनावरबाट मानिसमा प्रजाति अवरोधहरू पार गर्न सक्छन्, र मानिसहरूमा, सामान्य रुघाखोकीदेखि MERS र SARS जस्ता गम्भीर रोगहरूसम्मका रोगहरू निम्त्याउन सक्छन्। कोभिड-१९ निम्त्याउने भाइरसलाई अहिले इन्टरनेशनल कमिटी अफ ट्याक्सोनोमी अफ भाइरस (ICTV) ले SARS-CoV-19 नाम दिएको छ, किनभने यो SARS प्रकोप (SARS-CoVs) निम्त्याएको भाइरससँग मिल्दोजुल्दो छ। COVID-2 रोगको निदान परीक्षण धेरै तरिकामा विकास गर्न सकिन्छ।
विश्वव्यापी रूपमा सबैभन्दा लोकप्रिय र हाल अपनाइएको विधि भनेको SARS-CoV-2 भाइरस आफैं पत्ता लगाउन सक्ने निदान परीक्षण विकास गर्नु हो। यो परीक्षण RT-रियल टाइम पीसीआर (रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज-रियल टाइम पोलिमरेज चेन रियाक्सन) द्वारा बिरामीको नमूनामा भाइरल जीनोम पत्ता लगाउने आधारमा। यसले भाइरल आरएनएलाई रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज नामक इन्जाइमको प्रयोग गरेर डीएनएमा रूपान्तरण गर्न र त्यसपछि प्राइमरहरूको विशिष्ट सेट र फ्लोरोसेन्ट प्रोब प्रयोग गरेर DNA लाई एम्प्लीफाइ गर्ने, जो भाइरल DNA मा एक विशिष्ट क्षेत्रमा बाँध्छ, Taq पोलिमरेज प्रयोग गरी र फ्लोरोसेन्ट संकेत पत्ता लगाउँछ। यी परीक्षणहरूलाई NAATs (न्यूक्लिक एसिड प्रवर्धन परीक्षण) भनिन्छ। यो प्रविधि बिरामीको नमूनामा न्यूक्लिक एसिडको उपस्थितिको प्रारम्भिक पहिचानको लागि धेरै उपयोगी हुन सक्छ, कोविड-19 रोगका लक्षणहरू नदेखाउने एसिम्प्टोमेटिक बिरामीहरूमा पनि (विशेष गरी 14-28 दिनको इन्क्युबेशन अवधिमा) र पछिको भागमा। साथै जब रोग पूर्ण विकसित हुन्छ।
CDC (सेन्टर फर डिजिज कन्ट्रोल), एट्लान्टा, संयुक्त राज्य अमेरिका र डब्ल्यूएचओ दिशानिर्देशहरू (सेन्टर फर डिजिज कन्ट्रोल) मा आधारित SARS-CoV-2 पत्ता लगाउनको लागि NAAT आधारित डायग्नोस्टिक परीक्षण विकास गर्न विगत केही महिनाहरूमा विश्वभरका विभिन्न कम्पनीहरूले समयको बिरूद्ध दौडमा काम गरिरहेका छन्। १, २)। विश्वभरका स्वास्थ्य अधिकारीहरूले SARS-CoV-1 को पहिचानको लागि आपतकालीन प्रयोगको लागि यी परीक्षणहरूलाई अनुमोदन गर्दै आएका छन्। हालसम्म लक्षित भाइरल जीनहरूमा उपयुक्त सकारात्मक र नकारात्मक नियन्त्रणहरू सहित N, E, S र RdRP जीनहरू समावेश छन्। यस्तो परीक्षणको लागि सङ्कलन गरिने बिरामीको नमूनाहरू माथिल्लो श्वासप्रश्वास पथ (नासोफरिन्जियल र ओरोफरिन्जियल स्वाब) र/वा तल्लो श्वासप्रश्वास पथ (थूक र/वा एन्डोट्राचियल एस्पिरेट वा ब्रोन्कोआल्भियोलर लभेज) बाट हुन्छन्। यद्यपि, मल र रगत लगायत अन्य नमूनाहरूमा पनि भाइरस पत्ता लगाउन सम्भव छ। कोभिड-१९ को संदिग्ध केस परिभाषा पूरा गर्ने बिरामीहरूबाट, जैवसुरक्षा अभ्यासहरू (WHO[2] ले तोकेका दिशानिर्देशहरू अनुसार) सबै आवश्यक सावधानीहरू अपनाउँदै, यसको संरक्षण र प्याकेजिङ गर्ने गरी नमूनाहरू द्रुत रूपमा संकलन गर्न आवश्यक छ। राम्रो छ भने यसलाई डायग्नोस्टिक सेन्टरमा ढुवानी गर्न आवश्यक छ र त्यसपछि नमूना अखण्डता सुनिश्चित गर्न द्रुत रूपमा प्रशोधन (BSL-2 वा समकक्ष सुविधामा बायोसेफ्टी क्याबिनेटमा आरएनए निकाल्ने)। यो सबै राम्रो क्लिनिकल व्यवस्थापन र प्रकोप नियन्त्रणको लागि प्राथमिकताको आधारमा प्रदर्शन गर्नुपर्छ।
विश्वभरका प्रमुख डायग्नोस्टिक कम्पनीहरूद्वारा विकसित विभिन्न उपलब्ध NAAT आधारित परीक्षणहरूको पत्ता लगाउने समय ४५ मिनेटदेखि ३.५ घण्टासम्म फरक हुन्छ। यी परीक्षणहरूलाई पोइन्ट अफ केयर टेस्टमा रूपान्तरण गर्न र परिणामको शुद्धतामा सम्झौता नगरी सकेसम्म कम समयमा वांछित नतिजाहरू प्राप्त गर्न, एक दिनमा गर्न सकिने परीक्षणहरूको संख्या बढाउन विभिन्न सुधारहरू गरिँदै छन्।
अन्य निदान परीक्षण विकल्पहरू छन् द्रुत निदान परीक्षण (RDTs) कि त SARS-CoV-2 भाइरस कणहरूको सतहमा व्यक्त भाइरल एन्टिजेन्स/प्रोटिनहरू पत्ता लगाउँछन् किनभने तिनीहरू होस्ट कोशिकाहरूमा प्रतिकृति बनाउँछन् र संक्रमणको प्रतिक्रियामा रोग वा होस्ट एन्टिबडीहरू निम्त्याउँछन्; यो परीक्षणले COVID-19 (3) बाट संक्रमित भएको विश्वास गर्ने व्यक्तिको रगतमा एन्टिबडीको उपस्थिति पत्ता लगाउँछ।
भाइरल एन्टिजेन्स पत्ता लगाउन आरडीटीको शुद्धता र प्रजनन क्षमता रोग सुरु भएको समय, नमूनामा भाइरसको एकाग्रता, नमूनाको गुणस्तर र प्रशोधन, र परीक्षण किटहरूमा रहेको अभिकर्मकहरूको निर्माणलगायत धेरै कारकहरूमा निर्भर गर्दछ। यी चरहरूको कारणले गर्दा, यी परीक्षणहरूको संवेदनशीलता 34% देखि 80% सम्म फरक हुन सक्छ। यस विकल्पको प्रमुख कमजोरी यो हो कि भाइरल प्रोटिनहरू पत्ता लगाउन भाइरस यसको प्रतिकृति र संक्रामक चरणमा हुनु आवश्यक छ।
त्यसै गरी, होस्ट एन्टिबडीहरू पत्ता लगाउने परीक्षणहरू एन्टिबडी प्रतिक्रियाको शक्तिमा आधारित हुन्छन् जुन उमेर, पोषण स्थिति, रोगको गम्भीरता, र प्रतिरक्षा प्रणालीलाई दबाउन सक्ने केही औषधि वा संक्रमणहरू जस्ता कारकहरूमा निर्भर गर्दछ। यस विकल्पको एउटा प्रमुख कमजोरी यो हो कि SARS-CoV-2 भाइरसको संक्रमण भएको दिनदेखि हप्ताहरूमा एन्टिबडीहरू उत्पादन हुन्छन् र परीक्षण गर्न लामो समय कुर्नु पर्छ। यसको मतलब यो हो कि होस्ट एन्टिबडी प्रतिक्रियामा आधारित COVID-19 संक्रमणको निदान प्राय: रिकभरी चरणमा मात्र सम्भव हुन्छ, जब क्लिनिकल हस्तक्षेप वा रोग प्रसारणको रोकथामका धेरै अवसरहरू बितिसकेका हुन्छन्।
हाल, माथि उल्लेखित आरडीटीहरू केवल अनुसन्धान सेटिङमा अनुमोदन गरिएको छ र डाटाको कमीको कारणले क्लिनिकल निदानको लागि होइन (3, 4)। COVID-19 को लागि अधिक र अधिक महामारी विज्ञान डेटा उपलब्ध हुँदै जाँदा, थप RDTs विकसित गरिनेछ र क्लिनिकल सेटिङमा हेरचाह परीक्षणको रूपमा अनुमोदन गरिनेछ किनभने तिनीहरूले 10-30 मिनेटमा परिणाम दिन सक्छन् किनभने NAAT आधारित परीक्षणहरू औसतमा लिइन्छ। रोग पत्ता लगाउन केही घण्टा।
***
सन्दर्भ:
1. WHO, 2020। COVID-19 को लागि प्रयोगशाला परीक्षण रणनीति सिफारिसहरू। अन्तरिम निर्देशन। 21 मार्च 2020। मा अनलाइन उपलब्ध छ https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/331509/WHO-COVID-19-lab_testing-2020.1-eng.pdf 09 अप्रिल 2020 मा पहुँच
2. CDC 2020. प्रयोगशालाहरूको लागि जानकारी। प्रयोगशालाहरूको लागि अन्तरिम मार्गदर्शन अनलाइनमा उपलब्ध छ https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-nCoV/lab/index.html 09 अप्रिल 2020 मा पहुँच गरिएको।
3. WHO, 2020. पोइन्ट अफ केयर टेस्टको प्रयोगमा सल्लाह। वैज्ञानिक संक्षिप्त। 08 अप्रिल 2020। मा अनलाइन उपलब्ध छ https://www.who.int/news-room/commentaries/detail/advice-on-the-use-of-point-of-care-immunodiagnostic-tests-for-covid-19 09 अप्रिल 2020 मा पहुँच गरिएको।
4. ECDC, 2020. EU/EEA मा COVID-19 निदानको लागि द्रुत परीक्षण स्थितिको एक सिंहावलोकन। 01 अप्रिल 2020। रोग रोकथाम र नियन्त्रणको लागि युरोपेली केन्द्र। मा अनलाइन उपलब्ध छ https://www.ecdc.europa.eu/en/publications-data/overview-rapid-test-situation-covid-19-diagnosis-eueea 09 अप्रिल 2020 मा पहुँच
***
