भर्खरै रिपोर्ट गरिएको RTF-EXPAR विधि द्वारा परख समय लगभग एक घण्टाबाट केही मिनेटमा घटाइएको छ जसले रूपान्तरणको लागि रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज-मुक्त (RTF) दृष्टिकोण प्रयोग गर्दछ। आरएनए मा डीएनए एकल तापक्रममा एम्प्लीफिकेशनको लागि EXPAR (एक्सपोनेन्शियल एम्प्लिफिकेशन रियाक्शन) द्वारा पछ्याइएको।
को दर नियन्त्रण Covid-19 फैलाउन एक सटीक र छिटो भाइरस परीक्षण रणनीति चाहिन्छ। RT-PCR (रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज पोलिमरेज चेन रियाक्सन), हाल प्रयोग गरिएको सबैभन्दा सटीक परीक्षण विधि दुई-चरण परीक्षण हो जुन प्रति नमूना लगभग 60 मिनेट लाग्छ।
बर्मिङ्घम विश्वविद्यालयका अन्वेषकहरूले SARS-CoV-2 पत्ता लगाउनको लागि एउटा नयाँ विधि रिपोर्ट गरेका छन्। यसले धेरै छिटो परीक्षण सक्षम गर्न सक्छ र पर्याप्त रूपमा संवेदनशील छ।
भाइरल आरएनए पत्ता लगाउने RT-PCR (रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज पोलिमरेज चेन रियाक्सन) मा भाइरल आरएनएलाई पूरक DNA (cDNA) मा रूपान्तरण समावेश हुन्छ र त्यसपछि मात्रात्मक PCR (qPCR) द्वारा cDNA को प्रवर्धन हुन्छ। cDNA त्यसपछि फ्लोरोसेन्ट डाई प्रयोग गरेर पत्ता लगाइन्छ। यसले एक घण्टा सम्म लिन्छ।
नयाँ रिपोर्ट गरिएको RTF-EXPAR विधिले RNA को रूपान्तरणको लागि रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेस-फ्री (RTF) दृष्टिकोण प्रयोग गरी परख समय लगभग एक घण्टाबाट केही मिनेटमा घटाइएको छ। डीएनए एकल तापक्रममा एम्प्लीफिकेशनको लागि EXPAR (एक्सपोनेन्शियल एम्प्लिफिकेशन रियाक्सन) पछि। एकल तापक्रममा हुने एम्प्लीफिकेशन गतिको कुञ्जी हो, किनभने यसले RT-PCR को लामो तताउने र चिसो पार्ने चरणहरूलाई बेवास्ता गर्छ। यसबाहेक, प्रवर्द्धन भइरहेको DNA को खण्ड RT-PCR को तुलनामा सानो छ। तसर्थ, EXPAR ले केहि मिनेटमा DNA उत्पादनको 108 स्ट्र्यान्डहरू उत्पन्न गर्दछ। डुप्लेक्स गठन अनुगमन गरिन्छ, जस्तै RT-PCR विधिमा फ्लोरोसेन्ट डाई, SYBR ग्रीन प्रयोग गरेर।
चाखलाग्दो कुरा के छ भने, नयाँ विधिलाई आरएनए भाइरसबाट हुने अन्य धेरै संक्रामक रोगहरू पत्ता लगाउन परिमार्जन गर्न सकिन्छ, उदाहरणका लागि इबोला, आरएसभी, आदि।
स्रोत (हरू):
कार्टर एट अल (२०२०)। रिभर्स ट्रान्सक्रिप्टेज-फ्री एक्सपोनेन्शियल एम्प्लिफिकेशन रियाक्सन, RTF-EXPAR प्रयोग गरेर SARS-CoV-2020 RNA को उप-5 मिनेट पत्ता लगाउने। प्रिन्ट गर्नुहोस्। जनवरी ०४, २०२१ मा प्रकाशित medRxiv मा प्रकाशित। DOI: https://doi.org/10.1101/2020.12.31.20248236
***
